Amido Black (Acid Black 1) ist ein Farbstoff, der Proteine, wie sie z. B. in Blut vorkommen, blauschwarz färben kann. Amido Black wird sowohl auf Methanol-basierend als auch auf Wasser- und Wasser/Ethanol/Essigsäure-basierend geliefert. Amido Black in Methanol färbt stärker, ist aber wegen der Toxizität des Methanols auch gefährlicher.
 
Die auf Wasser/Ethanol/Essigsäure basierende Formuliering von CAST (The Centre for Applied Science and Technology - DSTL - UK) Wasser/Ethanol/Essigsäure-based formulation färbt ebenso gut wie die auf Methanol basierende. Insbesondere für die Verwendung auf einem Tatort (z. B. Schuhabdrücke in Blut) wird daher das Amido Black auf Wasser/Ethanol/Essigsäure- oder Wasserbasis (letztere Formulierung färbt weniger stark) empfohlen.
 
Bei der Verwendung von Amido Black auf porösen oder halbporösen Oberflächen kann es zu einer gewissen Hintergrundfärbung kommen. Amido Black fluoresziert nicht.

Auf welchen Oberflächen kann es verwendet werden?

st ein blauschwarzer Farbstoff, der in verschiedenen Formulierungen auf nicht porösen, halbporösen und porösen Oberflächen zur Anfärbung von Blutspuren verwendet wird.
Die Formulierungen, die wir anbieten, basieren auf:

• Methanol
• Wasser/Zitronensäure
• Wasser, Ethanol und Essigsäure [1]

Das methanolbasierte Verfahren ist das älteste (seit den 1970er Jahren, siehe Ref. 1), das essigsäurebasierte Wasser/Ethanol-Verfahren das neueste ([1], 2000). Im CAST-Handbuch [2] wird empfohlen, sowohl Amido Black als auch Acid Violet 17 an einem kleinen Stück eines porösen oder halbporösen Gegenstands zu testen, und zwar entfernt von der Stelle, an der eine Spur vermutet wird, um festzustellen, welches der beiden Verfahren die geringste Hintergrundfärbung verursacht.
Amido Black kann nicht nach dem Färben mit Acid Yellow 7 [Ref. 2, Seite 5-AD2] verwendet werden. Es färbt dann viel weniger stark als Acid Violet 17.

Vor der Verwendung von Amido Black, unabhängig von der verwendeten Formulierung, müssen die Blutspuren zunächst fixiert werden, um ein Durchlaufen der Spur zu vermeiden (Verlust von Details).

Fixierung von Blutspuren

Die Fixierung kann mit einer 2%igen Lösung von 5-Sulfosalicylsäure in Wasser erfolgen (20-23 Gramm in 1 Liter Demi-Wasser oder destilliertem Wasser). Um sicherzustellen, dass die Blutspur gut fixiert wird, empfehlen wir die folgende Methode, bei der saugfähiges Papier (z. B. Filterpapier, Taschentücher, Papiertücher) und eine Sprühflasche mit Sulfosalicylsäurelösung verwendet werden.

Nehmen Sie ein trockenes Stück saugfähiges Papier, das groß genug ist, um die zu fixierende Spur abzudecken. Halten Sie das Papier über die Schiene, parallel zur Oberfläche, und lassen Sie dann eine Seite des Papiers auf die Oberfläche fallen (z. B. eine kurze Seite, wenn es sich um ein Schuhspur handelt). Tränken Sie diesen Teil mit Fixierlösung über die ganze Seite, dieser Teil dient nun als eine Art Anker.

Befeuchten Sie nun das gesamte Papier mit der Sprühflasche, beginnend mit der Seite, die bereits auf/an das Spur liegt, und senken Sie den nassen Teil immer weiter auf das Spur. Dadurch wird verhindert, dass Luftblasen zwischen Papier und Spur gelangen. Arbeiten Sie langsam (das Papier dehnt sich aus, wenn es nass wird), und wenn das Gleis in der Vertikalen schräg ist (oder so gehalten werden kann), beginnen Sie an der oberen Seite und arbeiten Sie runter.

Wenn das nasse Papier die gesamte Spur bedeckt, lassen Sie es für 5 Minuten. Wenn das Blut eine dicke Schicht ist, länger (tiefere Schichten dürfen nicht fixiert werden!). Dann entfernen Sie das Papier. Das auf der Spur verbliebene Fixiermittel kann mit Wasser abgewaschen werden, ist aber nicht notwendig.
Wenn das Blut relativ frisch ist, hat es einen Farbwechsel von dunkelrot zu dunkelbraun vollzogen.

Verfahren zur Färbung

Sobald die Spur fixiert ist, kann sie mit der Amido Black-Lösung eingefärbt werden. Verwenden Sie zum Auftragen der Farbstofflösung eine Sprühflasche oder eine Spülflasche. Bei Fingerabdrücken kann eine Pipette verwendet werden oder ein nicht zu großer Gegenstand, der in ein Gefäß/Bad mit Farbstofflösung getaucht wird.

Die Verwendung einer Sprühflasche hat gegenüber der Verwendung einer Spülflasche den Nachteil, dass Methanol- oder Ethanoldämpfe (je nachdem, welche Formulierung verwendet wird) in die Luft abgegeben werden. Im Falle von Methanol ist dies gesundheitsschädlich. Die Verwendung einer Staubmaske, um das Einatmen des Sprühnebels zu verhindern, wird ebenfalls empfohlen.
Nachdem die Farbstofflösung aufgetragen wurde, lassen Sie sie etwa 3 Minuten lang mit der Spur in Kontakt. Dann spülen Sie die Oberfläche mit der gleichen Mischung ab, die Sie für die Farbstofflösung verwendet haben.
Methanol/Essigsäure im Falle der Methanolformulierung, Wasser oder Wasser mit Essig oder Zitronensäure im Falle der Formulierung auf Wasserbasis und Wasser/Ethanol/Essigsäure im Falle der Formulierung auf Methanolbasis. Für die Formulierung auf Methanol-/Essigsäurebasis gibt es eine zweite Spüllösung: eine 5%ige Essigsäurelösung (Wasser/Essig).

Befinden sich die Abdrücke auf dem Boden, kann die Spüllösung auch mit einem Wasserstaubsauger aufgesaugt werden. Auch saugfähiges Papier, wie es bei der Fixierung verwendet wird, kann zum Auffangen der Flüssigkeit verwendet werden. Das Abblasen der Lösungen mit einem Luftstrahl ist ebenfalls eine Möglichkeit.

Abnehmen

Mit Amido Black gefärbte Spuren fluoreszieren nicht, auch nicht nach dem Abnahme mit weißem Folien. Mit abnehmen können den Hintergrund und/oder die Hintergrundfluoreszenz beseitigt werden.

Bevor Sie anfangen können die Spur (auf einer nicht porösen Oberfläche) mit einem weißen Folien abzunehmen, muss sie vollständig trocken sein. Achten Sie beim Anbringen der Folie unbedingt darauf, dass sich keine Luftblasen zwischen der Folie und der Spur befinden. Lassen Sie die Folie recht lange einwirken, etwa 15 Minuten. Das Fotografieren der aufgenommenen Spuren sollte innerhalb weniger Stunden erfolgen. Der Grund dafür ist, dass der Farbstoff langsam durch die Folie in alle Richtungen diffundieren wird. Die Spur wird dadurch an Schärfe verlieren.
Das Abnehmen der Spur kann mehrmals durchgeführt werden, mit oder ohne zwischenzeitliches Nachfärben. In wichtigen Fällen ist es ratsam, mehrmals ab zu nehmen und neu zu färben.

Sicherheit

Amido Black Pulver reizt die Haut, die Augen und die Atemwege und kann schwere Augenschäden/Augenreizungen verursachen. In Lösung besteht natürlich keine Gefahr mehr für die Atemwege, aber ein Augenschutz wird auf jeden Fall empfohlen. Je nach Formulierung gibt es Dampfgefahr (nicht bei der Amido Black-Lösung auf Wasser/Zitronensäure-Basis). Die Methanolformulierung soll nur in einem Abzug verwendet werden. Auf ein Tatort ist der Methanoldampf zu gefährlich. Die Arbeitslösungen und die Spüllösung auf der Basis des Wasser- Ethanol-Gemischs bilden bei normalem Gebrauch keine schädlichen Dämpfe, obwohl der Essiggeruch irritierend sein kann. Bei der Verwendung großer Mengen oder bei hohen Temperaturen kann sich bei unzureichender Belüftung ein explosionsfähiges Ethanol-Luft- Gemisch bilden. Außerdem färben Amido Black-Lösungen auch Haut und Kleidung. Daher ist das Tragen von Handschuhen erforderlich (Nitrilhandschuhe bei der Methanolformulierung).

5-Sulfosalicylsäure-Pulver ist als reizend eingestuft worden, aber die 2%ige Lösung ist keine gefährliche Mischung. Aufgrund der Wirkung auf Blut wird dennoch empfohlen, bei der Anwendung Handschuhe zu tragen (Nitril-, Vinyl- oder Latexhandschuhe reichen aus). Auch das Tragen einer Schutzbrille ist keine schlechte Idee.

Vermeiden Sie das Einatmen von Sprays (Aerosolen). Übrigens, die Fixierlösung gibt keine Dämpfe ab. Waschen Sie sich nach jedem Gebrauch von Fixiermittel, Farbstoff oder Spüllösung die Hände, insbesondere vor dem Essen oder Trinken.

Zusammensetzung der Lösungen

Amido Black auf Methanolbasis

Verwenden Sie zur Herstellung der Amido Black-Lösung vorzugsweise einen Erlenmeyerkolben. Die Reihenfolge, in der Methanol und Essigsäure zu der eingewogenen Menge Amido Black- Pulver zugegeben werden, spielt keine Rolle. Lösen Sie es mit einem Magnetrührer und einer Rührbohne (mit PTFE überzogener Magnet) auf. Das Pulver löst sich langsam auf, ist aber durch die starke Färbung der Läsung nur schwer zu erkennen. Nehmen Sie sich genügend Zeit, um das Pulver aufzulösen (z. B. eine halbe Stunde).

Für die Spüllösung auf Methanolbasis werden die gleichen Mengen an Lösungsmittel wie für die Arbeitslösung verwendet, wobei das Amido Black-Pulver weggelassen wird.
Die zweite Spüllösung (5%iger Essig) wird durch Verdünnen von 50 ml Eisessig mit 950 ml demineralisiertem oder destilliertem Wasser hergestellt.

Amido Black auf Wasser/Ethanol/Essigsäure-Basis

Verwenden Sie zur Herstellung der Amido Black-Lösung vorzugsweise einen Erlenmeyerkolben. Die Reihenfolge, in der Methanol und Essigsäure zu der eingewogenen Menge Amido Black- Pulver zugegeben werden, spielt keine Rolle. Lösen Sie es mit einem Magnetrührer und einer Rührbohne (mit PTFE überzogener Magnet) auf. Das Pulver löst sich langsam auf, ist aber durch die starke Färbung der Lösung nur schwer zu erkennen. Nehmen Sie sich genügend Zeit, um das Pulver aufzulösen (z. B. eine halbe Stunde).

Für die Spüllösung auf Wasser/Ethanol/Essigsäure-Basis werden die gleichen Lösungsmittelmengen wie für die Arbeitslösung verwendet, wobei das Amido Black-Pulver weggelassen wird.

Blutfixier

Geben Sie die Komponenten zusammen in ein ausreichend großes Becherglas oder einen ausreichend großen Kolben/Flasche und mischen Sie, bis alles aufgelöst ist. Die Verwendung eines Magnetrührers mit Rührbohne wird empfohlen.

Referenzen und Fußnoten

[1] Sears, V.G.; Prizeman, T.M. "Enhancement of Fingerprints in Blood - Part 1: The Optimization of Amido Black" Journal of Forensic Identification 2000, Vol. 50, nr. 5, p. 470-480.
[2] Fingermark Visualisation Manual, Kapitel 5.PD ISBN: 978-1-78246-234-7, Home Office, Januar 2014. Nicht mehr erhältlich bei The Stationary Office.